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Autor(es):	Souza, Priscilla de Bastos
Título:	Espectroscopia de absorção molecular no infravermelho com transformada de Fourier supervisionada por reação em cadeia da polimerase para diferenciação de espécies de Acanthamoeba spp.
Data do documento:	2019
Resumo:	Amebas de vida livre são protozoários distribuídos globalmente que ocorrem em ambientes com diferentes características, por possuírem a capacidade de encistamento são resistentes a ambientes considerados hostis para outros micro-organismos. Dos organismos classificados como amebas de vida livre, destaca-se o gênero Acanthamoeba spp. Entre as doenças causadas por esses micro-organismos são relatadas a ceratite, a meningoencefalite e a encefalite amebiana granulomatosa, que podem levar um indivíduo à morte ou a perda da visão. Nessas situações, a detecção prematura é essencial para um desfecho favorável ao paciente e para a escolha de uma estratégia terapêutica eficaz. Sendo assim, nesse estudo foram exploradas duas metodologias para análise espectroscópica baseada em Espectroscopia de Absorção Molecular no Infravermelho com transformada de Fourier destinada a caracterização morfológica de espécies de Acanthamoeba spp. visando a sua diferenciação. Para o ensaio em que foram utilizados fragmentos de ágar, após 90 horas de crescimento em ágar PAGE, a 30ºC foi retirada a porção central do ágar. Posteriormente, as amostras foram submetidas à desidratação a 44ºC por cerca de 4 horas. A seguir, cada fragmento foi posicionado sobre cristal de ATR de três maneiras diferentes para obtenção de triplicata de espectros. Na análise de suspensão celular, após 48 horas de crescimento a 30ºC suspensões de células amebianas foram obtidas por lavagem com água deionizada e centrifugação (7000 rpm durante 10 minutos). O sobrenadante foi descartado. Alíquota de 1 a 2 µL do precipitado foram depositados sobre cristal de ATR e submetidos à corrente de ar quente para obtenção dos espectros. Estes foram normalizados pela amplitude (0-1) em planilha Microsoft Excel 2010 e foi realizada análise exploratória de dados por meio de Análise de Componentes Principais (PCA) em software Pirouette 4.0 (Infometrix) usando diferentes tipos de pré-processamento por variável (autoescalamento, centragem na média) e por amostra (1ª derivada (5 pontos). Na análise de PCA pela metodologia de suspensão celular, foi obtido cerca de 95% de variância acumulada, utilizando dois fatores. Por outro lado, para a metodologia em ágar, este mesmo percentual foi obtido com o uso de cinco fatores. Não ocorreu a formação de agrupamentos distintos entre as duas espécies, no entanto, foi observada uma tendência à formação de conjuntos, que pode ocorrer quando aumentada a diversidade da população, em especial, pela análise da suspensão de células de Acanthamoeba spp. Foram definidas faixas espectrais que podem ser utilizadas na discriminação de duas espécies de Acanthamoeba spp e identificada metodologia promissora para sua diferenciação a partir de modelo quimiométrico.
Nota:	Inclui bibliografia.
Instituição:	Universidade de Santa Cruz do Sul
Curso/Programa:	Curso de Farmácia
Tipo de obra:	Trabalho de Conclusão de Curso
Assunto:	Espectroscopia de infravermelho com Transformada de Fourier Espectroscopia molecular Acanthamoeba Amebíase
Orientador(es):	Bullé, Danielly Joani,
Coorientador(es):	Corbellini, Valeriano Antônio
Aparece nas coleções:	Farmácia

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